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康氏木霉HEX1蛋白的原核表达及纯化

2014-09-11分类号:Q78

【作者】唐俊  陆娟  许惠芬  陈捷  
【部门】阜阳师范学院生命科学学院  上海交通大学农业与生物学院  山东省淄博市桓台县林业局  
【摘要】【目的】对康氏木霉HEX1蛋白进行原核表达和纯化,为进行抗体制备及深入研究HEX1功能奠定基础。【方法】采用RT-PCR方法扩增康氏木霉hex1基因,构建pMD19-T-hex1重组克隆质粒,在此基础上构建pET28a-hex1表达载体,转化E.coli BL21(DE3)细胞。通过IPTG诱导表达,对重组HEX1蛋白进行可溶性分析、纯化及鉴定。【结果】成功克隆了长660bp的hex1基因并构建了融合表达载体,HEX1蛋白在IPTG诱导下得到表达。融合蛋白主要以包涵体形式存在,能与抗His标签的兔多克隆抗体发生特异性反应,并纯化出了融合表达蛋白。【结论】康氏木霉HEX1蛋白在原核细胞中得到成功...
【关键词】康氏木霉  HEX1  原核表达  蛋白纯化
【基金】国家自然科学基金项目(41001189); 安徽省高校自然科学研究重点项目(KJ2013A203); 阜阳师范学院科技成果孵化基金项目(2013KJFH04); 阜阳师范学院教研项目(2013JYXM30)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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