建鲤IL–1β和IL–8基因实时荧光定量RT–PCR检测方法的建立
2014-12-25分类号:S917.4
【部门】四川农业大学动物医学院动物微生态研究中心 乐山市市中区动物疫病预防控制中心
【摘要】根据Gen Bank上的基因序列,在保守区设定并合成特异性引物,选择β–actin作为内参基因,采用SYBR Green I染料法,进行熔解曲线分析和标准曲线的制作。熔解曲线表明,β–actin、IL–1β、IL–8的基因产物均为特异性产物,其Tm值分别为86、82.5和84℃;标准曲线表明,各基因Ct值的检测范围为12~32,扩增效率分别为96.3%,103.2%和102.6%,具有良好的线性关系,且r2均大于0.990;组内变异系数分别为0.14%~0.86%,0.18%~0.93%和0.13%~0.86%;用建立的方法检测健康建鲤头、肾组织中IL–1β、IL–8的表达情况,相对表达量分别...
【关键词】建鲤 IL–1β IL–8 实时荧光定量RT–PCR
【基金】四川省科学技术厅国际合作项目(2013HH0055); 四川省学术带头人培养基金
【所属期刊栏目】湖南农业大学学报(自然科学版)
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