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桑树MaDFR的克隆及功能分析

2014-11-25分类号:S888.2

【作者】李军  赵爱春  UMUHOZA Diane  王茜龄  刘长英  鲁成  余茂德  
【部门】西南大学生物技术学院/家蚕基因组国家重点实验室  贵阳中医学院  
【摘要】目的克隆桑树(Morus alba L.)二氢黄酮醇4-还原酶(dihydroflavonol-4-reductase,DFR)基因,并通过烟草过表达研究其对烟草黄酮生物合成的影响,为该基因功能分析及应用提供理论参考。方法采用RT-PCR的方法从桑树中克隆出Ma DFR,采用农杆菌介导的遗传转化技术,将Ma DFR导入模式植物烟草中,获得具有卡那抗性的转基因烟草植株,通过基因组PCR鉴定转基因阳性植株,采用反向PCR的方法分析T-DNA在烟草中的插入位点。通过定量PCR的方法分析Ma DFR在烟草中的表达水平,Al Cl3分光光度法测定转基因烟草中总黄酮含量,通过DPPH(1,1-二苯基-2-...
【关键词】桑树  DFR  烟草  过表达  黄酮  抗氧化
【基金】中央高校科研业务费专项(XDJK2013D020); 国家农业部公益性行业科研专项(201403064); 国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-22)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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