家蚕卵黄原蛋白受体BmVgR的体外表达
2014-09-29分类号:S881.2
【部门】西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室/农业部蚕桑重点实验室
【摘要】【目的】克隆家蚕卵黄原蛋白受体(vitellogenin receptor,VgR),分析其在昆虫细胞中的表达特征,了解正常VgR和突变VgR的表达模式,为阐明其生物学功能提供参考依据。【方法】基于家蚕VgR的基因编码序列设计特异引物,扩增的目的片段连接到载体pET28a上,构建原核表达载体,转化E.coil BL21(DE3)表达菌株,IPTG诱导获得目的蛋白;用镍柱亲和层析方法纯化诱导表达的家蚕VgR肽蛋白;将纯化后的肽蛋白制备BmVgR的兔源多克隆抗体;PCR扩增获得大造和突变型白妙卵(scanty vitellin,vit)的LBD1+EGF1结构域(C11D和C11V)片段,连接到细...
【关键词】家蚕 卵黄原蛋白受体 原核表达 细胞表达
【基金】国家高技术研究发展计划(“863”计划)(2011AA-100306); 国家青年基金(31101768); 国家自然科学基金(31201853)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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