PRRSV细胞受体CD163 SRCR5-SRCR6多克隆抗体的制备
2014-03-27分类号:S852.651
【部门】西北农林科技大学动物医学院预防兽医学系
【摘要】【目的】制备鼠抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)细胞受体CD163SRCR5-SRCR6多克隆抗体。【方法】提取PAM细胞总RNA,通过RT-PCR方法获得CD163SRCR5-SRCR6(第1 417~2 136bp,共720个bp)基因,将其克隆到pET-28a(+)载体上,构建重组表达载体pET-28a(+)-CD163,经酶切、PCR鉴定和测序验证后转化大肠杆菌,在BL21(DE3)中诱导重组目的蛋白表达,然后用Ni-NTA方法纯化目的蛋白,免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,通过间接ELISA和IFA方法检测多克隆抗体效价,并初步鉴定多克隆抗体血清结合细胞及阻断PRRSV感染细胞...
【关键词】PRRSV CD163 CD163SRCR5-SRCR6重组蛋白 多克隆抗体
【基金】国家自然科学基金项目(U0931003/L01); 国家“863”高技术研究发展计划项目(2011AA10A208)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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