牦牛β-防御素5基因的原核表达及表达产物的抑菌活性
2014-09-11分类号：S823.85
【部门】西南民族大学生命科学与技术学院 动物遗传育种重点实验室
【摘要】【目的】克隆与表达牦牛β-防御素5(BNBD5)基因,检测其重组蛋白的体外抗菌活性。【方法】采用RT-PCR方法从牦牛肺组织中扩增BNBD5基因成熟肽编码区,根据已发现的哺乳动物β-防御素5和部分禽β-防御素5的序列构建遗传进化树。将BNBD5基因亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)的BamHⅠ和XhoⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒pET32a-BNBD5。将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21,用IPTG于37℃进行诱导表达,SDSPAGE检测融合蛋白的表达情况,并对该重组蛋白进行纯化,测定其体外抑菌活性。【结果】克隆得到了BNBD5基因成熟肽编码片段,其长度为138bp,编码45个氨基酸...
【关键词】牦牛 β-防御素5 重组蛋白 抑菌活性
【基金】国家科技支撑计划项目(2012BAD13B06); 西南民族大学中央高校基本科研业务费专项(13NZYQN24,TS11126)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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