药用植物苦参SSR-PCR体系的优化与验证
2014-10-15分类号:S567.53
【部门】山西农业大学农学院 山西省农业科学院生物技术研究中心 农业部黄土高原作物基因资源与种质创制重点实验室
【摘要】为有效利用SSR-PCR技术对药用植物苦参进行遗传多样性分析,采用正交设计L16(45)对影响苦参SSRPCR体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP、引物)在4个水平上进行优化,PCR结果用DPS数据处理软件分析,筛选出各因素的最佳水平,建立适宜苦参SSR-PCR的反应体系和扩增程序,并选用内蒙古苦参对该体系进行稳定性验证。结果表明:在10μL的苦参SSR-PCR体系中,模板DNA的用量为20.0ng,Taq DNA聚合酶的用量为0.2~0.6U,Mg2+的浓度为2.5mmol/L,dNTPs浓度为0.1mmol/L,引物的浓度为0.6μmol/L。扩增程序为:94℃预变性3...
【关键词】苦参 SSR 优化 正交设计
【基金】山西省科技攻关项目(20130311004-3); 山西省财政支农项目(2011NYGX-05); 中国博士后基金项目(112118); 山西农业大学博士科研启动经费(xb2011011)
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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