蓖麻种子cDNA-AFLP反应体系的优化
2014-06-28分类号：S565.6
【部门】内蒙古民族大学生命科学学院 内蒙古高校蓖麻产业工程技术研究中心 内蒙古民族大学农学院 内蒙古通辽市农业科学研究院
【摘要】以蓖麻种子为研究对象,优化其cDNA-AFLP反应体系,为研究不同蓖麻材料或不同发育阶段的蓖麻种子内脂肪酸基因表达差异奠定理论基础。试验结果表明:提取蓖麻种子总RNA;将RNA逆转录为cDNA,用高频限制性内切酶EcoRⅠ和MseⅠ进行酶切,并与EcoRⅠ、MseⅠ接头连接,得到连接产物;连接产物稀释40倍作为预扩增模板,进行预扩增;优化选择性扩增反应体系,得到最佳反应体系为:10×PCR Buffer 2.0μL、dNTPs(10 mmol/L)1.4μL、Mg2+(25 mmol/L)1.4μL、模板稀释80倍1.0μL、Ex扩增引物(50 pmol/μL)1.2μL、My扩增引物(50 ...
【关键词】蓖麻 脂肪酸 cDNA-AFLP
【基金】国家自然科学基金项目(30760123;31160290;31060194); 内蒙古自然科学基金项目(2010BS0511); 内蒙古人才基金项目; 内蒙古民族大学市校合作项目(SXZD2012018); 内蒙古民族大学教育教学研究项目(No.2009053)
【所属期刊栏目】华北农学报
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