马铃薯蛋白激酶基因StPki的遗传转化及表达分析
2014-02-28分类号:S532
【部门】山东省农业科学院蔬菜花卉研究所 国家蔬菜改良中心山东分中心 山东省设施蔬菜生物学重点实验室 青岛农业大学生命科学院 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
【摘要】以高抗青枯病二倍体马铃薯基因型ED13为材料,克隆了蛋白激酶基因StPki。以StPki基因特异区段为靶标,成功构建了该基因的RNA干扰植物表达载体pCHF1-StPki。利用重组农杆菌株LBA4404(pCHF1-StPki)感染转化ED13茎段外植体,获得了抗庆大霉素的再生植株。利用CaMV35S启动子特异引物对再生植株进行PCR检测,结果表明获得了转基因植株。利用StPki基因的特异引物对转基因植株进行半定量RT-PCR分析,结果显示该基因的转录受到了抑制。马铃薯抗病基因型ED13已被成功转化,且表现出了对StPki基因的RNA干扰活性。
【关键词】马铃薯 二倍体 蛋白激酶基因 遗传转化 表达抑制
【基金】国家“863”项目(2013AA102603-4); 国家科技支撑计划项目(2012BAD02B05-10); 山东省自然科学基金项目(Y2007D24); 山东省良种工程农业生物资源创新利用项目(PTBR2013)
【所属期刊栏目】华北农学报
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