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烟草花叶病毒原核表达外壳蛋白抗体制备及快速检测方法建立

2014-08-28分类号:S435.72

【作者】卢训  方琦  尹跃艳  秦西云  丁铭  
【部门】云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所  云南省农业生物技术重点实验室  农业部西南农业基因资源与种质创制重点实验室  云南省烟草农业科学研究院  
【摘要】用RT-PCR从感染烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的烟草样品中克隆该病毒的外壳蛋白基因,病毒外壳蛋白基因再亚克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,构建成重组原核表达载体,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导、Ni+NTA亲和柱纯化获重组蛋白。以纯化的重组蛋白为抗原免疫家兔,制备TMV外壳蛋白多克隆抗体,并用制备的多克隆抗体建立了更简便、经济、特异性更强的DOT-ELISA检测法。
【关键词】烟草花叶病毒  原核表达  多克隆抗体  DOT-ELISA
【基金】中国烟草总公司重点科技项目(110200902065); 云南省烟草公司科技计划项目(2010YN19)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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