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基于环式等温扩增的烟草青枯病病原菌快速检测方法

2014-02-15分类号:S435.72

【作者】贾蒙骜  陈兴江  林叶春  商胜华  
【部门】贵州省烟草科学研究院烟草行业烟草分子遗传重点实验室  中国农业大学农学与生物技术学院  
【摘要】针对烟草青枯病的防控,开发快速、高效的病原菌检测方法是必要的。环式等温扩增(LAMP)是一种在等温条件下快速完成靶标基因扩增的新方法。将青枯病菌贵州分离株FQY4基因组序列(NCBI号:CP004013)与其他已发表菌株序列比对分析,确定编码鞭毛蛋白的fliC基因的保守区域可被选作检测靶标。根据LAMP原理以及靶标序列的特点,设计了一组由6条引物组成的环式等温扩增反应体系。结果表明:61℃条件下孵育45min,可完成对青枯病病原菌单菌落和带菌烟草叶片的检测,结果判定可以通过颜色变化被肉眼直接识别,也可以通过琼脂糖凝胶电泳检测。通过这种新方法,可以实现对青枯病菌菌落的快速鉴别,还可以用于对田间疑...
【关键词】烟草  茄科劳尔氏菌  fliC基因  环介导的等温扩增
【基金】贵州省科学技术基金项目(黔科合J字[2013]2194号); 中国烟草总公司贵州省公司科技计划项目(201022)
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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