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通过缺失大丽轮枝菌Vdku80构建其高效基因敲除受体菌株

2014-06-01分类号:S432.4

【作者】田李  刘娜  徐荣旗  曲志才  刘乾  
【部门】曲阜师范大学生命科学学院  中国农业科学院生物技术研究所  
【摘要】【目的】验证大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)非同源末端连接途径关键基因Vdku80的功能,构建高效的大丽轮枝菌基因敲除受体菌株。【方法】利用常规基因敲除的方法,构建大丽轮枝菌Vdku80基因缺失的突变体菌株ΔVdku80。即将Vdku80的同源重组DNA片段(Vdku80的基因组上下游DNA片段之间连接潮霉素抗性基因)通过农杆菌介导的转化转入大丽轮枝菌,通过同源区段的重组,潮霉素抗性基因便会替换掉野生型Vdku80,从而获得突变体菌株ΔVdku80。对突变体菌株ΔVdku80的生物学表型,即生长速率、产孢量和对棉花的致病性进行测试。分别以大丽轮枝菌野生型菌株和ΔVdku8...
【关键词】大丽轮枝菌  基因敲除效率  同源重组  非同源末端连接
【基金】国家自然科学基金项目(31170080); 中国博士后科学基金项目(2013M531567); 山东省自然科学基金项目(ZR2013CQ018); 曲阜师范大学科研启动基金项目
【所属期刊栏目】中国农业科学
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