猪β_2肾上腺素能受体基因克隆及穿梭表达质粒的构建
2014-09-19分类号:Q78
【部门】中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所/农业部农产品质量安全重点实验室 河北北方学院食品科学系 北京勤邦生物技术有限公司
【摘要】【目的】利用重组β2肾上腺素能受体(β2AR)检测β2激动剂类药物,是弥补传统免疫学检测方法不足、实现该类违禁物多残留的快速检测手段。获得高纯度、高亲和力的重组受体是该技术的核心和难点。本文克隆猪β2 AR并构建其重组穿梭表达质粒,为筛选最适宜的受体表达系统和表达条件提供基础材料。【方法】克隆猪β2AR并进行序列分析,完成重组穿梭表达质粒构建。首先采集新鲜猪肝组织,提取总RNA,根据GenBank已登录的猪β2AR核苷酸序列(AF000134),设计1对引物并进行RT-PCR扩增。扩增产物切胶回收后与pMD-18T载体于4℃、T4连接酶作用下连接过夜。连接产物转化DH5α感受态细胞,经蓝白斑筛...
【关键词】猪 β2肾上腺素能受体 基因克隆 序列分析 穿梭表达质粒
【基金】国家公益性行业(农业)科研专项(201203094)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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