灰飞虱原肌球蛋白的基因克隆、原核表达及多克隆抗体制备
2014-09-29分类号:Q78
【部门】江苏省农业科学院植物保护研究所 南京师范大学生命科学学院
【摘要】【目的】通过筛选灰飞虱cDNA酵母表达文库发现原肌球蛋白(tropomyosin,Tm)能与水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)P10蛋白发生互作。研究旨在克隆灰飞虱原肌球蛋白基因(Tm),将其在原核细胞中进行表达,纯化Tm蛋白,免疫大白兔并制备其多克隆抗体,为进一步分析Tm在灰飞虱与RBSDV互作过程中的作用提供抗体条件。【方法】根据与之高度同源的Tm基因信息确定灰飞虱Tm的开放阅读框(open reading frame,ORF)。提取灰飞虱总RNA,采用RT-PCR方法从灰飞虱中克隆Tm的ORF,连接至pMD-18T载体后进行测序...
【关键词】灰飞虱 原肌球蛋白 克隆 原核表达 多克隆抗体
【基金】国家公益性行业(农业)科研专项(201003031); 国家自然科学基金(31170142,31471768); 江苏省农业科技自主创新资金(CX(13)5019)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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