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养殖刺参“腐皮综合征”致病菌——灿烂弧菌的原位杂交检测方法的建立与应用

2013-04-15分类号:S947.9

【作者】王印庚  荣小军  张凤萍  王岚  廖梅杰  邹安革  
【部门】农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所  黑龙江省宁安市水产局  蓬莱市安源水产有限公司  
【摘要】以养殖刺参"腐皮综合征"的重要致病菌——灿烂弧菌Vibrio splendidus的16S~23S间隔区序列,设计特异性引物,用PCR方法制备地高辛(DIG)标记探针,建立了原位杂交技术检测感染刺参体内灿烂弧菌的技术方法,并利用该方法对人工感染刺参和健康刺参各组织进行检测。结果显示,感染刺参的体壁结缔组织、肌肉组织、肠粘膜上皮、辐水管等组织的原位杂交检测呈阳性,而与健康刺参组织无交叉反应。在感染组织中,阳性信号(显色)强弱清晰,能准确反映出灿烂弧菌的侵染部位及感染程度,这为探明灿烂弧菌的感染途径、感染病程等致病机理研究奠定了基础,也为养殖刺参疾病预防和健康管理提供了技术支撑。
【关键词】刺参  腐皮综合征  灿烂弧菌  PCR  原位杂交
【基金】科研院所技术开发研究专项(2011EG34219); 山东省农业良种工程重大课题“速生;抗病;耐高温刺参良种选育”; 国家自然科学基金项目(31202016); “十二五”863项目(2012AA10A412); 青岛市科技计划项目(11-1-11-hy)共同资助
【所属期刊栏目】渔业科学进展
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