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鲤疱疹病毒Ⅱ型TaqMan real-time PCR检测方法的建立及应用

2013-04-15分类号:S943

【作者】周勇  曾令兵  张辉  范玉顶  徐进  
【部门】中国水产科学研究院长江水产研究所  
【摘要】针对鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)DNA解旋酶基因编码区序列设计特异性引物,利用PCR技术扩增出长度为1 446 bp的基因编码区片段,克隆到pMD19T载体上,构建重组质粒。经PCR鉴定与测序分析确认正确后,以10倍梯度稀释重组质粒,作为标准模板进行TaqMan real-time PCR扩增,制作标准曲线,建立了鲤疱疹病毒Ⅱ型的荧光定量PCR检测方法。检测结果显示,标准曲线的相关系数(R2)达到0.999 1,斜率为-3.412;对初始模板定量检测的范围为1×101~1×107copies/μL;特异性试验结果表明,该方法可特异性地检测出鲤疱疹...
【关键词】鲫  造血器官坏死症  鲤疱疹病毒Ⅱ型  TaqMan real-time PCR  检测方法
【基金】现代农业产业技术体系建设专项(CARS-46-11); 中国水产科学研究院基本科研业务费(2013A0606)
【所属期刊栏目】水产学报
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