急性病毒性坏死病毒引物酶表达及酶学活性分析
2013-09-15分类号：S941
【部门】中国海洋大学水产学院 海水养殖教育部重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所
【摘要】根据急性病毒性坏死病毒(acute viral necrosis virus,AVNV)ORF 024序列设计引物,以AVNV的DNA为模板进行扩增AVNV引物酶(primase)基因,同时构建表达质粒pET32a-prim,并转化至E.coli BL21(DE3)进行诱导表达。SDS-PAGE检测显示诱导表达两条蛋白条带,其中分子量为60 ku的蛋白条带与预期表达蛋白条带大小一致,另一蛋白条带分子量约为55 ku,经Western-blotting及质谱分析鉴定分子量60 ku的蛋白条带为AVNV-引物酶,而表达出的55 ku蛋白条带存在部分引物酶多肽片段。RNA结合荧光染料Pico-Gre...
【关键词】引物酶 原核表达 Pico-Green核酸染料 酶学活性 多聚胞嘧啶寡核苷酸
【基金】现代农业产业技术体系建设专项(CARS-48)
【所属期刊栏目】水产学报
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