荧光定量PCR作为猪瘟兔化弱毒疫苗效价检验替代方法的研究与应用
2013-01-01分类号:S858.28
【部门】四川农业大学动物医学院 中国兽医药品监察所 新疆维吾尔自治区畜牧科学院
【摘要】【目的】建立一种快速、敏感、特异的检测猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)的荧光定量PCR方法(FQ-PCR),为猪瘟兔化弱毒疫苗的效力检验提供一替代方法。【方法】在猪瘟兔化弱毒疫苗基因组3′非编码区设计一对针对猪瘟兔化弱毒株的特异性引物和一条MGB探针,并进行反应体系及反应条件优化,以及特异性、灵敏度、稳定性及符合性试验。将此方法用于部分批次疫苗厂疫苗半成品的定量检验,与兔热反应进行比较,寻求两方法的相关性。【结果】试验结果证实,CT值与模板之间呈现良好的相关性,相关系数为0.9998,扩增效率为101.14%;该方法仅扩增HCLV,不扩增HCLV以外的其它病原,显示良好的特异性;具有较高的灵敏度,...
【关键词】猪瘟兔化弱毒疫苗 效价检验 荧光定量PCR TaqMan-MGB
【基金】“十一五”国家支撑计划课题(2006BAD06A18,2006BAD06A12); 新疆维吾尔自治区2012科技援疆项目(201291150)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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