家蚕丝腺生物反应器表达狂犬病病毒核蛋白
2013-09-16分类号：S852.65
【部门】浙江大学动物科学学院特种经济动物科学系 湖北省畜禽育种中心 浙江大学农业部动物病毒学重点实验室
【摘要】【目的】采用家蚕丝腺生物反应器这一蛋白高效表达系统,尝试建立一种高效、低廉、稳定生产狂犬病病毒核蛋白(RVNP)的技术体系,为生产基因工程疫苗奠定基础。【方法】通过RT-PCR方法克隆获得RVNP序列,采用家蚕丝胶蛋白基因(Ser1)启动子为特异性启动子,将RVNP构建到含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)筛选标记基因的piggyBac转座子表达载体(pBA3EGFP)中,并采用显微注射转基因家蚕技术构建家蚕丝腺生物反应器。【结果】G1代通过EGFP标记的筛选获得转基因家蚕阳性蛾区26个,蛾圈阳性率为59.09%。PCR实验证实RVNP已经整合到家蚕基因组中,Western blot分析表明RV...
【关键词】狂犬病 丝腺生物反应器 piggyBac 家蚕
【基金】国家重点基础研究发展“973”计划(2012CB114601); 国家高技术研究发展“863”计划(2012AA101303); 农业公益性行业技术专项(201103032)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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