Pen a 1表位抗原多克隆抗体的制备及鉴定
2013-08-01分类号:TS207.3
【部门】中国农业科学院农产品加工研究所 中国计量学院生命科学院
【摘要】【目的】建立一种识别、检测致敏蛋白的新方法。【方法】Pen a 1为虾中主要的致敏蛋白,从其5个主要IgE结合区中选择一段具有代表性的(85—105位)含21个氨基酸的多肽序列,进行化学合成,将多肽分别与匙孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)偶联,制得免疫原和包被原,免疫原免疫新西兰纯种白兔得到多克隆抗体。以刀额新对虾蛋白、卵清蛋白、花生蛋白和牛奶蛋白为样品,免疫印迹鉴定多克隆抗体对刀额新对虾中Pen a 1蛋白的特异性。【结果】经Ellman试剂测定多肽与KLH、BSA的偶联比分别为12﹕1和8﹕1。间接非竞争ELISA测定多克隆抗体的效价达1.024×106,间接竞争ELISA(i...
【关键词】Pena1 表位多肽抗原 多克隆抗体 间接竞争ELISA 免疫印迹
【基金】农业部公益性行业科研专项(201103007); 国家“十二五”科技支撑计划课题(2011BAK10B03)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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