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4种有机磷农药DNA适体的筛选及结构分析

2013-11-30分类号:TQ450.1

【作者】王丽  刘贤金  张存政  刘媛  屠康  
【部门】南京农业大学食品科技学院  安徽科技学院食品药品学院  江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/农业部食品质量安全监控重点开放实验室  
【摘要】利用SELEX技术从一个固定的随机ssDNA库中同时筛选甲拌磷、丙溴磷、水胺硫磷、氧化乐果4种有机磷农药的DNA适体。随着筛选轮数的增加,4种有机磷农药从固定的随机库中洗脱的ssDNA逐渐富集,经过12轮的筛选,筛选效率达到40.8%。对第12轮洗脱的ssDNA进行克隆、测序,挑选的15个阳性克隆均测序成功,由于部分克隆具有完全一致的序列,最终筛选到5条ssDNA序列。一级结构序列分析表明5条ssDNA具有一定的同源性,二级结构预测表明5条ssDNA的二级结构主要以茎环结构为主,表明茎环结构可能是适体结合4种有机磷农药的基础。
【关键词】有机磷农药  DNA适体  指数富集的配体系统进化(SELEX)  筛选  结构分析
【基金】国家自然科学基金项目(31201369); 江苏省农业自主创新项目[CX(10)236]
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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