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连翘ISSR-PCR反应体系的建立及优化

2013-10-10分类号:S793.9

【作者】汤正辉  祝亚军  谭运德  谭晓风  
【部门】中南林业科技大学  河南省林业科学研究院  
【摘要】通过正交设计的方法优化连翘ISSR—PCR反应体系,PCR结果用MINITAB 16数据处理软件分析,建立了适用于连翘ISSR反应的最适反应体系(25μL):Taq DNA聚合酶1.2U、Mg2+浓度1.5 mmol·L-1、模板DNA 20~80 ng、dNTPs 0.3 mmol·L-1、引物0.3μmol·L-1。进行了梯度退火试验,得到连翘ISSR—PCR反应体系最佳退火温度为55℃。
【关键词】连翘  ISSR—PCR  优化  正交设计
【基金】国家林业公益性行业科研专项(编号:200904024); 河南省博士后科研资助(编号:2011044)
【所属期刊栏目】中南林业科技大学学报
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