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光皮桦木质部cDNA-AFLP技术体系的建立及应用

2013-11-15分类号:S792.15

【作者】江成  林二培  黄华宏  童再康  
【部门】浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室培育基地  
【摘要】为了挖掘光皮桦材性相关基因,本研究以光皮桦木质部为材料,通过对RNA的提取、cDNA的反转录及纯化的对比分析,以及选扩体系优化等,建立了相应的cDNA-AFLP体系。结果表明:采用CTAB和RNAiso试剂相结合的方法得到的RNA质量较好,cDNA经纯化后选扩效果明显变好。选扩体系为:4.0μL预扩产物(稀释40倍)、1.6μL的引物(10.0μmol/L)、0.2μL的dNTP(2.5 mmol/L)、0.4μL的Mg2+(25.0 mmol/L),以及0.2μL的Taq DNA聚合酶(5 U/μL)。进一步以来自不同木质化茎段的cDNA为模板,筛选出31对扩增效果较好的引物组合,同时分离出...
【关键词】光皮桦  cDNA-AFLP  木质化  基因表达
【基金】国家自然科学基金项目(31100494); 浙江省农业科技重点项目(2011C12014); 浙江农林大学研究生科研创新基金项目(3122013240217)
【所属期刊栏目】北京林业大学学报
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