毛白杨抗坏血酸过氧化物酶基因PtAPX2的克隆表达及分析
2013-01-15分类号:S792.119
【部门】北京林业大学生物科学与技术学院 林木花卉遗传育种教育部重点实验室
【摘要】以毛白杨总RNA为模板反转录得到cDNA,克隆获得抗坏血酸过氧化物酶基因家族中的一个成员PtAPX2 864bp的编码序列。该基因编码的蛋白包含287个氨基酸,理论分子质量为31.78ku,C末端包含锚定于过氧化物酶体跨膜结构域,推断其为过氧化物酶体定位蛋白。构建了PtAPX2原核表达载体,在大肠杆菌中表达获得了纯化的重组蛋白,并对其进行了酶学性质分析。PtAPX2对抗坏血酸的Km值为(1.37±0.22)mmol/L,Vmax值为(3.95±0.46)mmol/(L·min·mg);对H2O2的Km值为(0.026±0.003)mmol/L,Vmax值为(1.27±0.03)mmol/(L·...
【关键词】毛白杨 抗坏血酸过氧化物酶 克隆 重组表达 酶学性质 表达量分析
【基金】国家自然科学基金项目(31170574); 教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET-08-0730); 教育部科学技术研究重点项目(106039)。
【所属期刊栏目】北京林业大学学报
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