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毛白杨4-香豆酸:辅酶A连接酶(4CL3)的酶学特征研究

2013-10-15分类号:S792.117

【作者】饶国栋  张永卓  魏弘宜  蒋湘宁  陆海  张建国  
【部门】国家林业局林木培育重点实验室  中国林业科学研究院林业研究所  北京林业大学  
【摘要】为了进一步研究杨树4CL基因,以毛白杨为材料克隆到一个新的毛白杨4CL3基因。生物信息学分析结果显示:该基因和其他4CL基因一样含有4CL基因家族2个保守框Box I和Box II。将4CL3基因连接至原核表达载体pQE30,表达纯化后测定其蛋白的比活力,结果显示:4CL3基因对不同底物表现出了不同的催化效率。对该基因的最适温度和最适pH值测定后发现:4CL蛋白的最适温度为40℃,最适pH值为8.5,且在pH=9.0时有60%的活力。采用HPLC-MS的方法,分析了4CL3蛋白对混合底物的催化情况,结果显示:在混合底物下,4CL3蛋白对4-香豆酸、阿魏酸和肉桂酸都表现较高的活力,而对芥子酸和咖...
【关键词】4-香豆酸:辅酶A连接酶  HPLC-MS  原核表达  毛白杨
【基金】北京市教育委员会科学研究与研究生培养共建项目-学科建设-森林培育(20120618)
【所属期刊栏目】林业科学研究
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