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栉孔扇贝急性病毒性坏死病毒巢式PCR检测方法的建立

2013-02-15分类号:S944.4

【作者】李晨  王崇明  曲朋  黄倢  
【部门】中国水产科学研究院黄海水产研究所  中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室  
【摘要】为更好地实现对养殖海区栉孔扇贝急性病毒性坏死病毒(acute viral necrosis virus,AVNV)的快速诊断和分子流行病学的调查,以及AVNV的疫情监测,选择AVNV全基因组序列中的保守区段,应用Accelrys gene 2.5软件设计一对巢式引物,用于AVNV的检测。结果显示,引物的扩增片段分别为979和548 bp。实验优化了PCR体系中Mg2+和dNTPs浓度及扩增程序中的退火温度,并建立了完善的AVNV巢式PCR检测技术。研究表明,该PCR检测技术具有较高的敏感性,可稳定检测出5 pg扇贝样品组织总核酸中5×10 copies的病毒粒子。
【关键词】栉孔扇贝  急性病毒性坏死病毒  巢式PCR
【基金】现代农业产业技术体系建设专项(CARS-48); 科技部国际合作项目(2010DFA31720)
【所属期刊栏目】水产学报
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