中国明对虾肌肉组织蛋白质双向电泳技术体系的建立
2013-02-15分类号:S917.4
【部门】浙江工商大学食品与生物工程学院 渤海大学化学化工与食品安全学院食品科学研究院 大连民族学院生命科学学院 广东海洋大学食品科技学院 湛江国联水产开发股份有限公司 杭州博拓生物技术有限公司
【摘要】为了探索并建立中国明对虾的肌肉蛋白双向电泳体系,实验将中国明对虾的肌肉组织溶解处理后,通过固相pH梯度胶条等电聚焦、SDS-PAGE垂直电泳对蛋白质进行分离,对不同的裂解液配方、IPG胶条的pH范围及其长度、等电聚焦程序、上样量等进行了优化,并分别利用银染和考染方法进行染色,应用PDQuest软件对图谱进行了初步分析。结果显示,中国明对虾肌肉蛋白的等电点主要位于4~7之间,裂解液中添加硫脲、CHAPS、DTT等,可以增加对虾肌肉蛋白的提取率;采用17 cm,pH 4~7的中型IPG胶条,主动水化上样120μg,适当延长除盐时间和等电聚焦时间,搭建盐桥,采用浓度为12.5%的二向分离胶和硝酸银染...
【关键词】中国明对虾 肌肉蛋白质 双向电泳 蛋白质组学
【基金】国家“十二五”科技支撑计划(2012BAD29B06); 浙江省杰出青年科学基金项目(R3110345); 辽宁省食品安全重点实验室暨辽宁省高校重大科技平台开放课题(LNSAKF2011029)
【所属期刊栏目】水产学报
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