草鱼成熟脂肪细胞总RNA提取方法研究
2013-01-15分类号:S917.4
【部门】西北农林科技大学动物科技学院
【摘要】获得高质量的RNA是逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、Northern blot以及转录组测序(RNA-Seq)等分子生物学研究的基础,由于草鱼脂肪细胞中油脂含量较高,从中提取高质量RNA存在困难。本研究以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)成熟脂肪细胞为材料,通过增加离心和抽提次数等方式对传统总RNA提取方法进行优化,采用琼脂糖凝胶电泳、核酸定量分析及基因扩增等方法验证所得RNA的完整性、纯度及质量。结果表明,经此方法提取的草鱼成熟脂肪细胞总RNA的A260 nm/A280 nm比值在1.95到2.00之间,28S和18S条带完整,草鱼LPL和β-actin基因扩增条...
【关键词】RNA提取 脂肪细胞 草鱼(Ctenopharyngodon idellus)
【基金】国家自然科学基金项目(31072223)
【所属期刊栏目】淡水渔业
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