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草鱼肠道粘膜上皮细胞的分离与原代培养

2013-01-15分类号:S917.4

【作者】姚仕彬  叶元土  蔡春芳  姚林杰  许凡  刘猛  萧培珍  王丽宏  
【部门】苏州大学医学部  北京市营养源研究所系统营养工程技术研究中心  
【摘要】以强化培育后草鱼的肠道粘膜为试验材料,采用不同消化法和离心转速梯度分离肠道粘膜细胞团,分别试验不同培养液与不同CO2浓度组合、胎牛血清浓度及细胞接种浓度时细胞生长效果,并且观察草鱼原代肠道粘膜细胞生长过程,同时采用3种细胞形态观察法、MTT检测法及相关酶活力系统评价细胞培养效果。结果表明:采用机械刮取消化法,分离转速为400 r/min,在使用M199培养液、6%CO2、15%胎牛血清、接种浓度为2×103(个/孔)条件下可批量复制草鱼原代肠道粘膜上皮细胞;细胞增殖过程符合动物原代肠道粘膜上皮细胞生长分化规律,采用荧光倒置显微镜与Giemsa染色法相结合、MTT检测法、AKP酶活力及LDH/M...
【关键词】草鱼  肠道粘膜细胞  分离方法  原代培养
【基金】国家自然科学基金(31172417); 苏州市应用基础(农业)项目(N313401210)
【所属期刊栏目】上海海洋大学学报
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