半滑舌鳎类胰岛素生长因子-Ⅰ的原核表达及活性分析
2013-07-15分类号：S917.4
【部门】农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 青岛市海水鱼类种子工程与生物技术重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所 上海海洋大学水产与生命学院
【摘要】根据半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Güther)类胰岛素生长因子-Ⅰ(IGF-I)基因的cDNA序列,设计引物扩增编码IGF-I成熟肽序列,此序列由210个碱基组成,包括B-C-A-D 4个功能域。利用PCR方法将扩增片段克隆到原核表达载体pET-28a上,得到重组质粒,将重组质粒导入到大肠杆菌BL21(DE3)后经IPTG诱导产生N端含6个组氨酸的融合蛋白。以SDS-PAGE电泳检测和SigmaScan软件分析获得的多肽,结果表明:IGF-I融合蛋白大小为11.4 kD,IPTG诱导3 h时目的蛋白表达量最高,占细菌总蛋白的58.5%,1 L菌液表达目的蛋白40.7...
【关键词】半滑舌鳎 IGF-I 原核表达 生物活性
【基金】国家863计划项目(2012AA10A413); 山东省自然科学基金资助项目(ZR2012CQ025); 鲆鲽类现代产业技术体系项目(CARS-50); 中央级公益性事业单位基本科研业务费项目(20603022012022)
【所属期刊栏目】中国水产科学
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