坛紫菜TPS基因的克隆及其原核表达
2013-10-28分类号：S917.3
【部门】青岛农业大学生命科学学院 山东省植物生物技术高校重点实验室 中国海洋大学海洋生命学院 中国科学院遗传与发育学研究所
【摘要】以叶状体总DNA为模板,用3对DNA引物进行PCR扩增,获得了坛紫菜6-磷酸海藻糖合成酶基因(PhTPS)3个重叠的片段,大小分别为1.3,1.1,0.7 kb。用pMD18-T载体克隆这些片段,经测序与序列拼接获得了该基因完整的ORF序列,其长度为2 727 bp。在已经构建条斑紫菜TPS基因原核表达载体pET22b-PyTPS的基础上,用PhTPS基因替代该表达载体中的PyTPS基因,获得了PhTPS基因的原核表达载体pET22b-PhTPS。重组菌BL21(pET22b-PhTPS)经IPTG诱导,SDS-PAGE显示获得了约100 kDa的特异性蛋白条带;目测及OD600的测定结果表明...
【关键词】坛紫菜 TPS基因 原核表达 重组菌 耐盐性
【基金】国家转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08009-100B)
【所属期刊栏目】华北农学报
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