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桑树查尔酮异构酶基因的克隆与原核表达分析

2013-02-15分类号:S888

【作者】刘长英  赵爱春  李军  吕蕊花  余亚圣  王茜龄  鲁成  余茂德  
【部门】西南大学生物技术学院家蚕基因组生物学国家重点实验室  
【摘要】以果叶兼用新桑品种‘嘉陵30号’的果实为材料,采用同源克隆法和抑制PCR法克隆桑树查尔酮异构酶基因(MaCHI)全序列。该基因的基因组序列全长2402bp,包含2112bp长的ORF和290bp长的3'UTR序列,ORF由4个外显子和3个内含子组成,该基因编码219个氨基酸。预测MaCHI编码蛋白质的分子质量为23.8ku,理论等电点为5.29。采用RT-PCR法分析MaCHI在不同组织中的表达水平,在叶片和果中的表达量较高,在根中表达量较低。构建pET-28a(+)-MaCHI原核表达重组质粒,并在大肠杆菌中诱导表达。
【关键词】桑树  查尔酮异构酶  基因克隆  组织表达  原核表达
【基金】国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-22); 重庆市蚕桑重大科技专项(CSTC,2009AA1024)
【所属期刊栏目】林业科学
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