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IBDV荧光定量RT-PCR检测方法的建立及其应用

2013-04-28分类号:S858.31

【作者】何秀苗  甘珊珊  熊忠贤  禤金彩  廖艳娟  韦平  
【部门】广西民族大学化学与生物转化过程重点实验室  广西林产化学与工程重点实验室  广西大学  
【摘要】研究根据传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因序列设计了两条引物,通过RT-PCR技术对IBDV的VP2进行扩增,构建IBDV-VP2的标准品质粒,建立基于IBDV-VP2基因的荧光定量RT-PCR检测(QRT-PCR)技术和标准曲线,并检测该QRT-PCR体系的特异性、灵敏度和重复性,最后将该QRT-PCR体系应用于鸡外周血淋巴细胞(PBLs)中IBDV超强毒株(vvIBDV)复制规律以及临床样品的检测。结果表明,建立的QRT-PCR体系特异性好,不能与NDV、IBV及FAV1等发生反应,敏感度为1.51×101拷贝数/μl,扩增效率达1.018,重复性试验组内变异系数和组间变异系数均小于...
【关键词】鸡传染性法氏囊病  荧光定量RT-PCR  鸡外周血淋巴细胞
【基金】广西青年科学基金项目(桂科青0991014); 广西自然科学基金项目(2012GXNSFAA053060,0728058)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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