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转录靶向猪Jiv基因shRNA细胞株的建立及抗猪瘟病毒转基因猪的构建

2013-01-01分类号:S858.28

【作者】郭抗抗  雷安民  宁蓬勃  程敏  何雷  刘伟  谭学超  徐磊  曹伟伟  张彦明  
【部门】西北农林科技大学动物医学院  
【摘要】【目的】构建转入靶向猪Jiv基因shRNA干扰片段的阳性细胞株,通过比较各细胞株对猪瘟病毒增殖的干扰效果,筛选对猪瘟病毒增殖有明显抑制作用的细胞株,为抗猪瘟转基因猪的构建提供材料。【方法】研究设计了靶向猪Jiv基因的4个shRNA干扰片段,并构建插入干扰片段的慢病毒(P1、P2、P3、P4)。将慢病毒分别转染PK-15细胞,阳性细胞接种猪瘟病毒后72 h用实时荧光定量PCR检测猪瘟病毒RNA的量,以比较4种干扰细胞株对猪瘟病毒增殖的干扰效果。将对猪瘟病毒增殖有较好干扰效果的P2慢病毒干扰载体转染猪胎儿成纤维细胞,获得稳定表达靶向猪Jiv基因shRNA干扰片段的猪胎儿成纤维细胞株,作为抗猪瘟病毒...
【关键词】猪瘟病毒  RNA干扰  慢病毒  转基因猪
【基金】农业部转基因生物新品种培育重点项目(2009ZX08006-006B)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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