秦川牛FABP4基因重组腺病毒载体的构建与鉴定
2013-04-01分类号：S858.23
【部门】西北农林科技大学动物科技学院 国家肉牛改良中心
【摘要】【目的】旨在通过构建秦川牛FABP4基因的重组腺病毒载体,为在细胞水平研究FABP4基因的功能和作用机制做准备。【方法】根据GenBank收录的牛FABP4基因mRNA序列设计引物,PCR扩增并克隆测序。将目的基因连接到穿梭载体pAdTrack-CMV上并用PmeⅠ线性化后,转化含有腺病毒骨架载体pAdEasy-1的E.coli BJ5183感受态细胞进行同源重组,得到重组质粒pAd-FABP4,并用PacⅠ酶切鉴定。将经过PacⅠ线性化的pAd-FABP4转染HEK 293A细胞进行病毒包装和扩增,TCID50法测定病毒滴度。【结果】经测序鉴定本次克隆的FABP4序列与GenBank收录的一...
【关键词】秦川牛 FABP4基因 pAdTrack-CMV pAdEasy-1 腺病毒
【基金】国家“863”计划项目(2011AA100307-02,2013AA102505); 国家自然科学基金项目(31272411,31000998); 国家“十二五”科技支撑计划(2011BAD28B04-03); 国家转基因生物新品种培育重大专项(2011ZX08007-002); 国家肉牛牦牛产业技术体系(CARS-38); 长江学者;创新团队项目(IRT0940); 陕西省科技统筹创新工程计划(2011KTCL02-07)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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