潮霉素浓度和农杆菌浸泡时间对黄瓜外植体再生的影响
2013-04-15分类号:S642.2
【部门】沈阳农业大学园艺学院
【摘要】选用再生能力较强的黄瓜自交系M8为试验材料,在再生体系建立的基础之上,采用根癌农杆菌介导法将转化酶抑制子基因转入黄瓜中。将农杆菌菌液浸泡过的子叶节分别接种在浓度梯度为1mg.L-1到10 mg.L-1的选择培养基上,研究子叶节对潮霉素的耐受性和敏感度。使用农杆菌菌液浸泡5,10,15,20min,分别接种到筛选培养基上,研究浸泡时间对转化效率的影响。结果表明:HygB的选择压浓度为6mg.L-1,侵染时间为15min时,再生频率最高,为18.9%。经PCR检测表明转化酶抑制子基因已经整合到黄瓜基因组中,转化率为2.0%。
【关键词】黄瓜 根癌农杆菌 遗传转化 优化 转化酶抑制子
【基金】国家自然科学基金项目(30971999); 辽宁省教育厅重点实验室基金项目(2009S092)
【所属期刊栏目】沈阳农业大学学报
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