牛SREBP1基因shRNA序列的筛选及其腺病毒载体的构建与鉴定
2013-12-01分类号：S823
【部门】西北农林科技大学动物科技学院 国家肉牛改良中心
【摘要】【目的】筛选可靶向干扰牛的SREBP1基因的有效shRNA,构建相应腺病毒载体并包装重组腺病毒,为在细胞水平上研究SREBP1基因的功能和作用机制提供基础。【方法】以秦川牛SREBP1基因为研究对象,首先靶向其编码区(coding sequence,CDS)序列设计并合成6条干扰和1条阴性对照shRNA,并构建表达载体pENTR-U6-shRNA。然后与载体psiCHECK-Ⅱ-SREBP1共转染293A细胞,筛选有效的pENTR-U6-shRNA。其次将筛选的pENTR-U6-shRNA和阴性对照pENTR-U6-NC分别与腺病毒骨架载体pAd/PL-DEST体外重组,得到腺病毒重组载体,并...
【关键词】牛 SREBP1 shRNA 重组腺病毒
【基金】国家自然科学基金(31272411); “十二五”国家863计划(2011AA100307-02); 教育部“长江学者;创新团队发展计划”(IRT0940); “十二五”国家科技支撑计划(2011BAD28B04-03); 国家转基因生物新品种培育重大专项(2011ZX08007-002); 国家肉牛牦牛产业技术体系(CARS-38)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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