麻楝ISSR-PCR反应体系的建立及优化
2013-08-20分类号:S792.33
【部门】中国林业科学研究院热带林业研究所
【摘要】模板DNA、引物、三磷酸碱基脱氧核苷酸(dNTPs),镁离子(Mg2+)浓度、Taq DNA聚合酶的用量以及退火温度是影响简单序列重复区间扩增-聚合酶链式反应(ISSR-PCR)的主要因素。以麻楝Chukrasia tabularis叶片基因组DNA为试验材料,系统地测试这6个因素对麻楝ISSR-PCR反应结果的影响。结果表明:最优的反应体系为20μL反应体系中含30 ng模板DNA,1.00μmol.L-1随机引物,0.15 mmol.L-1dNTPs,2.50 mmol.L-1Mg2+,2.50×16.67nkat Taq DNA聚合酶。最佳退火温度为56℃,ISSR-PCR反应程序为94...
【关键词】林木育种学 麻楝 ISSR PCR条件 优化
【基金】国家引进国际先进农业科学技术计划(“948”计划)项目(2009-4-02)
【所属期刊栏目】浙江农林大学学报
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