标题
  • 标题
  • 作者
  • 关键词

小麦花粉电穿孔转化因素优化和转基因植株获得及鉴定

2013-06-16分类号:S512.1

【作者】张小红  赵雪晶  李波  黎飞飞  刘沛璇  闵东红  
【部门】西北农林科技大学生命科学学院/旱区作物逆境生物学国家重点实验室  西北农林科技大学农学院/旱区作物逆境生物学国家重点实验室  西南财经大学国际商学院  
【摘要】【目的】通过优化电穿孔转化技术主要参数,得到候选转基因植株,探索普通小麦(Triticumaestivum L.)电穿孔遗传转化体系。【方法】以冬小麦品种济麦19为受体,GUS为外源基因,将扬花期成熟花粉以最适电场强度和操作温度进行电穿孔处理后,人工授粉济麦19,最终收获种子;利用PCR技术、Southern技术、化学染色方法对T1、T2植株进行鉴定。【结果】电穿孔转化以电场强度6 kV.cm-1、冰上处理花粉,花粉密度为5×106个/mL,以及去雄后第5天授粉为最佳参数;Southern杂交检测结果表明,T2阳性植株的2个株系检测到杂交信号,同时其幼根、叶片等组织经GUS表达活性的组织化学染...
【关键词】小麦  花粉  花粉电穿孔转化  参数优化
【基金】国家转基因重大专项项目(2011ZX08002002-001); 国家“863”计划项目(2011AA100501)
【所属期刊栏目】中国农业科学
文献传递