小麦ATG8的原核表达及其抗血清制备
2013-02-28分类号:S512.1
【部门】河北农业大学生命科学学院植物逆境生理研究室
【摘要】提取小麦品种L10的总RNA,进行反转录,其产物用于探究自噬基因ATG8的生物学功能。用PCR方法克隆ATG8,将克隆的ATG8亚克隆至表达载体PMD19-T,酶切后切胶回收,然后把产物测序鉴定,转化宿主菌E.coliRosetta-gami B(DE3),构建原核表达系统,将融合蛋白纯化后制备其兔抗血清,然后利用Western Blotting技术对兔抗血清进行检测,鉴定了该抗血清的结合特异性。ATG8抗体的成功制备,为小麦中ATG8基因和自噬功能的研究奠定了基础。
【关键词】ATG8 免疫印迹 抗血清 融合蛋白 原核表达
【基金】国家自然科学基金(30671244;31171472); 河北省应用基础研究计划重点基础研究项目(08965505D); 河北省自然科学基金(C2007000515;C2010000787)
【所属期刊栏目】华北农学报
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