甘薯羽状斑驳病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立
2013-04-15分类号:S435.31
【部门】沈阳农业大学农学院 沈阳农业大学生物科学技术学院 河南省农业科学院植物保护研究所/河南省农作物病虫害防治重点实验室/农业部华北南部作物有害生物综合治理重点实验室
【摘要】依据甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)外壳蛋白(CP)基因的保守区设计引物和TaqMan探针,经过对反应体系和反应条件的优化,建立了特异、灵敏、高效的SPFMV实时荧光定量PCR检测方法。试验结果表明:该方法能检测到目的病毒,标准曲线的斜率和相关系数分别为-3.307和0.998,扩增效率为100.6%。最低可检测到约5.46个拷贝的阳性质粒,灵敏度比常规PCR高2个数量级。建立的实时荧光定量PCR方法可用于田间样品的检测,为SPFMV的早期预警和流行学研究提供了技术手段。
【关键词】甘薯羽状斑驳病毒 实时定量PCR 荧光探针
【基金】国家甘薯产业技术体系建设项目(CARS-11-B-07)
【所属期刊栏目】沈阳农业大学学报
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