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利用卡那霉素筛选菊花转基因植株的方法研究

2013-09-30分类号:S682.11

【作者】刘鹏  陈素梅  房伟民  蒋甲福  管志勇  陈发棣  
【部门】南京农业大学园艺学院  
【摘要】将菊花品种‘神马’的叶盘和茎段分别接种含有0、5、7.5、10、15和20 mg·L-1卡那霉素(Kan)的再生培养基和生根培养基上,以建立简单有效的转基因菊花Kan抗性株系的筛选方法。结果表明:菊花叶盘不定芽分化筛选和生根筛选的Kan临界耐受质量浓度分别为10和7.5 mg·L-1。通过农杆菌介导法转化2 400个叶盘,经Kan筛选后得到358个抗性不定芽,经Kan生根筛选后得到65个生根株系。为了有效剔除假阳性植株,用500 mg·L-1的Kan溶液浸泡菊花转基因再生株系的叶片,通过性状观察筛选出6个Kan抗性株系,且6个抗性株系都通过PCR手段得到验证。表明成功建立了简单有效的筛选转基因...
【关键词】转基因菊花  卡那霉素  抗性再生  筛选
【基金】江苏省科技支撑计划项目(BE2011325); 国家农业科技成果转化项目(2010GB2360063); 国家863计划项目(2011AA100208); 教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET-10-0492); 江苏省高校科研成果产业化推进项目(JHB2011-8); 国家自然科学基金项目(31272202)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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