拟南芥耐盐相关基因AtSTK原核表达载体的构建及表达
2013-04-28分类号:Q943.2
【部门】河北师范大学生命科学学院 河北师范大学汇华学院
【摘要】提取拟南芥总RNA,反转录获得cDNA后PCR扩增获得1 212 bp目的基因AtSTK。将该基因片段构建到PET-32a表达载体,转化大肠杆菌Rosetta菌,用IPTG进行诱导表达。该基因表达的最佳诱导条件为IPTG终浓度1mmol/L,诱导时间为4 h,此时融合蛋白表达量最高。该融合蛋白存在于包含体中,经包含体溶解、复性,最终纯化获得了AtSTK融合蛋白,为AtSTK蛋白的理化性质研究奠定了基础。
【关键词】拟南芥 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 原核表达 耐盐基因
【基金】国家自然科学基金(30900104); 河北省自然科学基金(C2009000271)
【所属期刊栏目】华北农学报
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