冰核细菌Erwinia ananas 110冰核基因iceA的原核表达及冰核活性分析
2013-08-25分类号：Q933;S433
【部门】湖南省作物种质创新与资源利用重点实验室 湖南省植物病虫害生物学与防控重点实验室
【摘要】为获得具有高冰核活性的基因工程菌,从冰核细菌Erwinia ananas 110扩增冰核基因iceA,将其克隆到pMD19–T载体上,转化大肠杆菌DH5α,单、双酶切鉴定并测序;阳性克隆目的片段亚克隆到表达载体pET–23a(+)上,转化大肠杆菌DH5α,单、双酶切鉴定重组质粒;阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,并经IPTG诱导表达。SDS–PAGE电泳检测表明,冰核基因iceA能够并以包涵体形式表达,相对分子质量约为180 000。冰核活性测定结果表明,重组菌BL21(DE3)pLysS/pET–ice的冰核活性与野生冰核细菌Erwinia ananas 110在–5、–...
【关键词】冰核细菌 原核表达 冰核蛋白 冰核活性
【基金】湖南省杰出青年基金(10JJ1005)
【所属期刊栏目】湖南农业大学学报(自然科学版)
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