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生长素结合蛋白AtTIR1和IAA28的原核表达及纯化

2013-12-25分类号:Q786

【作者】赵欣  刘会珍  罗为桂  苏益  蔺万煌  
【部门】湖南农业大学植物激素与生长发育湖南省重点实验室  
【摘要】以pGEX–KG为骨架,运用分子克隆方法构建了生长素结合蛋白AtTIR1和IAA28的原核表达载体,通过转化不同表达菌株探索了2种蛋白的诱导表达条件。结果表明:在0.4 mmol/L IPTG诱导下,GST–IAA28融合蛋白在表达菌株Tuner中的表达量最高,其适宜诱导温度为16℃;在0.6 mmol/L IPTG诱导下,BL21(DE3)中GST–IAA28的表达量最高;在各种浓度的IPTG诱导下,Rosetta中的GST–IAA28的产量均不高;在25℃和0.4mmol/L IPTG诱导条件下,Rosetta中的GST–AtTIR1表达总量最高,每克细菌可诱导出约0.2 mg的目标蛋白,...
【关键词】生长素结合蛋白  AtTIR1基因  IAA28基因  原核表达  蛋白质纯化
【基金】国家自然科学基金重大研究计划项目(91317312); 湖南省高校创新平台开放基金项目(11K032;13K065)
【所属期刊栏目】湖南农业大学学报(自然科学版)
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