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重组谷氨酰胺转胺酶的表达、复性及纯化

2013-01-15分类号:Q78

【作者】邵坤彦  彭宝玉  叶程  刘威  何冬兰  
【部门】中南民族大学生命科学学院  
【摘要】以吸水链霉菌基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到谷氨酰胺转胺酶基因片段,构建pGEX-TGase重组质粒,并转化到大肠杆菌中得到重组菌BL21/pGEX-TGase。重组菌经乳糖诱导产生融合蛋白,并对诱导条件进行了优化。表达产物主要以包涵体形式存在,采取稀释及尿素梯度液相色谱结合的方法,成功地实现了包涵体蛋白的复性。通过GST亲和柱纯化目的蛋白,得到酶活为29U/mg的电泳纯目的蛋白。
【关键词】谷氨酰胺转胺酶  乳糖诱导  包涵体蛋白  纯化  复性
【基金】湖北省自然科学基金项目(2010CDZ046)
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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