哈茨木霉HP37-4纤维二糖水解酶Ⅰ基因的克隆及表达
2013-10-28分类号:Q78
【部门】亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室 广西大学生命科学与技术学院
【摘要】从哈茨木霉(Trichoderma harzianum)HP37-4中克隆得到纤维二糖水解酶Ⅰ基因的全长DNA序列,并从HP37-4总RNA中通过RT-PCR扩增得到该基因全长cDNA序列。序列测定分析表明该基因含有3个外显子和2个内含子,编码含505个氨基酸的多肽。利用生物信息学方法对该蛋白质的结构进行了分析,推测了其主要功能区的位置及结构特征。将该基因cDNA序列克隆到大肠杆菌表达载体pET30a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达该基因。SDS-PAGE分析表明该基因能在大肠杆菌中过量表达,但以不溶性的包涵体形式存在,经包涵体变性和多肽复性后,纯化得到了表达的重组蛋白。
【关键词】哈茨木霉 纤维二糖水解酶 基因克隆 表达
【基金】广西科技攻关项目(桂科攻11107008-5)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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