单端孢酶烯3-O-乙酰转移酶编码基因Tri101的原核表达及多克隆抗体制备
2013-08-16分类号：Q78
【部门】江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省转基因生物安全评价公共技术服务中心
【摘要】【目的】克隆Tri101并通过原核表达获得纯化蛋白,通过免疫SPF大白兔获得高效价、高灵敏度的多克隆抗体,为Tri101蛋白及转Tri101作物的检测提供抗体基础【。方法】以禾谷镰刀菌(Fusarium graminearium)F3210为材料,PCR法获得Tri101并连接至表达载体pET29a(+),将重组表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3)后利用IPTG进行诱导表达。利用纯化表达产物制备多克隆抗体。【结果】SDS-PAGE分析结果表明,Tri101在大肠杆菌BL21(DE3)中得到表达,重组蛋白大小为50 kD左右,以包涵体形式存在。利用HisTrap亲和柱纯化重组蛋白,最佳咪唑洗脱...
【关键词】单端孢酶烯3-O-乙酰转移酶 Tri101 原核表达 多克隆抗体 小麦赤霉病
【基金】国家自然科学基金项目(30901006); 江苏省农业科技自主创新资金项目(CX(11)4116); 国家转基因重大专项(2009ZX0811-015B)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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