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抗果蝇组蛋白乙酰转移酶Atac2单克隆抗体的制备

2013-01-26分类号:Q75

【作者】马延森  李晓  陈志  兰向丽  武小椿  靳亚平  刘伟  
【部门】西北农林科技大学动物医学院农业部动物生物技术重点实验室  
【摘要】【目的】制备抗果蝇组蛋白乙酰转移酶Atac2的单克隆抗体,为进一步研究Atac2基因的功能提供重要的试验工具。【方法】PCR扩增果蝇Atac2蛋白N端前26个氨基酸的编码基因,构建GST-Atac2融合蛋白表达载体pGEX-Atac2。转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),进行诱导表达,通过GST亲和层析法纯化GST-Atac2融合蛋白。以GST-Atac2为抗原免疫8周龄的Balb/c小鼠,取脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA法检测阳性孔,经有限稀释法亚克隆,筛选单克隆杂交瘤细胞株,检测抗体的特异性、效价和亚型,并检测其亲和常数。【结果】PCR扩增获得了目的片段。成功...
【关键词】果蝇  Atac2  原核表达  单克隆抗体
【基金】西北农林科技大学引进人才启动项目(Z111021005)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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