双分子荧光互补技术(BiFC)分析玉米SSⅠ与PPDK1之间的蛋白互作
2013-06-21分类号：S513
【部门】吉林农业大学生命科学学院 吉林省农业科学院农业生物技术研究所 吉林大学生命科学学院
【摘要】【目的】分析玉米胚乳可溶性淀粉合成酶(SSⅠ)与质体型糖酵解途径关键催化酶丙酮酸磷酸双激酶(PPDK1)的蛋白互作关系,揭示可能发生互作的亚细胞位置。【方法】采用酶切连接的方法构建326-CYCHA-ss1和326-CYNEE-ppdk1双分子荧光互补表达载体,转化农杆菌EHA105,瞬时浸染烟草叶片组织,激光共聚焦显微镜下观察SSⅠ和PPDK1相互作用产生的荧光信号。【结果】双酶切试验鉴定表明,326-CYCHA-ss1和326-CYNEE-ppdk1重组载体构建正确;PCR结果证实,植物表达载体成功转化到农杆菌EHA105中;双分子荧光互补试验中,可观测到SSⅠ和PP-DK1相互结合而产生...
【关键词】SSⅠ PPDK1 双分子荧光互补技术(BiFC) 瞬时转化 蛋白质互作
【基金】国家自然科学基金项目(31170731,31200611); 上海市科学技术委员会资助项目(10DZ2271800); 吉林省博士后科研项目[吉人社办字(2009)第100号]
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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